Olink蛋白质组学送样建议-诺禾致源

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Olink血液蛋白质组学

1. 样品种类
2. 样品收集与分析前处理

声明：
实验室不接收《人间传染的病原微生物名录》（点击查看）的所有样品。对于高毒性动植物等样品，必须事先通过销售、客服或运营经理与诺禾致源技术人员联系，确定无高致病性和传染性后才能寄送样品。
提取风险提示和注意事项：核酸提取质量与物种及组织部位、采集方法及保存状态、提取方法及操作、实验器材及环境等因素均有密不可分的联系，尤其是三代超长提取对样本的要求更高。组织提取时可能受到上下游处理操作的影响，因此较难保证单次提取满足质量要求，客户应在寄送组织样品前进行备份。为了保障获得高质量的核酸，请务必按照送样手册所规定的准备样本。对珍贵样本或者微量样本，建议自行提取。取样过程中，需要全程佩戴手套，并且使用预冷乙醇对取样器材进行擦拭消毒，以免样本污染。

Olink技术适用于人和小鼠的多种样本类型，包括标准品：血清、血浆；非标品：脑脊液、细胞培养液、组织裂解液、房水、乳汁、皮肤胶条、干血斑、尿液、唾液、外泌体、组织间隙液等。标准品请依据以下送样建议进行实验，非标品请联系产品经理获取实验方法。

产品类型	采集方法	存储	运输	送样体积
血浆	抗凝管采血	-80°C	干冰运输	≥40ul
血清	血清采血管			≥40ul
非标样品	具体样本咨询产品经理			蛋白浓度：0.5-1mg/ml 体积：100-500ul

（一）样本收集方法

1.血清样本
1)收集全血到干净的采血管中；
2)让血液在室温下凝固15-30分钟。注意，放置时间不要过长，超过60分钟的样品，凝结的细胞有可能重新溶解；
3)在预冷的离心机（2°C-8°C）中以1000-2000 xg离心10分钟，吸取上清并转移到干净的管中，储存在-80℃。
2.血浆样本
1)收集全血到抗凝采血管中（EDTA采血管、柠檬酸采血管或肝素采血管皆可）；
2)在预冷的离心机（2°C-8°C）中以1000-2000 xg离心10分钟，以去除血浆中的细胞；
3)立即将血浆转移到干净的管中，并储存在-80℃。
3.细胞裂解液、组织裂解液、外泌体
1)将裂解的蛋白浓度定容到0.5-1mg/mL；
2)注意事项：
普通洗涤剂的浓度不应过高（Triton或Tween的最大值不超过1%）；
控制阴离子去污剂含量（最多0.1%的SDS或脱氧胆酸盐）；
避免过高或过低pH值的缓冲溶液（pH值应在生理水平左右）；
避免高盐；保证低于以下浓度：<250mM 氯化钠；<25mM氯化钾；<10mM氯化镁；
避免高水平的EDTA（保持<25mM）；
避免变性剂；
避免还原剂成分含量过高（例如，将其保持在<1 mM DTT以下）。
4. 细胞上清
1)收集在培养基中的细胞，用PBS洗涤3次并离心，将细胞在无血清培养基中培养24小时，最后取其上清液于干净的管中，并储存在-80℃；
2)注意避免培养过程中引入外源性蛋白。

（二）采集管种类及尺寸

1)任何指定用于采集血清或血浆的市售采集管均可；
2)请确保所有样本的采集方式（同一时间、同一温度等）和采集管种类相一致（同一品牌、同一规格等）。

（三）样品寄送注意事项

1)样本运输：样本通常应在采取干冰运输（即抵达时仍应冷冻）；
2)样品体积：请提供 ≥40微升（μL）的样品（建议体积：96孔板中每个样50μL，Eppendorf试管中每个样本100-500μL）；
3)样品数量：对于Olink进行的分析，每个受试者/患者只需要一管血浆或血清即可；
4)样品标记：用耐温标签或记号笔清楚地标记样品板或试管，例如，一个简单的字母数字代码，以便您以后可以识别（如“A、B、C”、“1、2、3”或“A1、A2、A3”）；
5)样本数量：建议整板送样；
6)注意事项：标准样品（血清、血浆）不需预实验，按要求准备样本后可直接开始正式实验。非标样本（如尿液、干血斑、皮肤胶条、唾液、痰液等）按照《非标品收样指南》进行收样，可以不进行预实验，具体情况请联系销售评估。
以上内容仅供参考，具体实验操作需结合实验室实际情况和具体要求进行调整。